HoxB7 Plasmide Double Nickase (h): sc-404331-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxB7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxB7 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxB7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXB7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxB7 Antibody (747C4a): sc-81292
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxB7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404331-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxB7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404331-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB7 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxB7, un regolatore legante il DNA che contribuisce a definire la patterning antero-posteriore e l’identità dei tessuti durante lo sviluppo embrionale. Nelle cellule differenziate, HoxB7 può modulare programmi di espressione genica associati a proliferazione, plasticità epitelio-mesenchimale e migrazione cellulare attraverso il controllo trascrizionale di effettori a valle. Un’espressione deregolata di HOXB7 è stata riportata in molteplici contesti tumorali ed è spesso studiata per la sua associazione con fenotipi invasivi e con un’alterata segnalazione dei fattori di crescita. In quanto fattore di trascrizione dello sviluppo, HoxB7 rappresenta un nodo utile per indagare reti di regolazione genica, il controllo trascrizionale dipendente dalla cromatina e programmi associati alla linea cellulare in modelli cellulari umani.
HoxB7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXB7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXB7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXB7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXB7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.