HoxB3 Plasmide Double Nickase (h): sc-405460-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxB3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxB3 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxB3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXB3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxB3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxB3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB3 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxB3, un regolatore del legame al DNA specifico per sequenza che contribuisce a stabilire la patterning antero-posteriore e l’identità dei segmenti durante lo sviluppo embrionale. Nelle cellule umane, HoxB3 modula programmi trascrizionali legati alla specificazione di linea, alla differenziazione e a reti di segnalazione guidate da morfogeni che coordinano lo stato della cromatina e l’espressione genica dello sviluppo. Un’espressione deregolata di HOXB3 è stata associata ad alterazioni degli stati di differenziazione e a circuiti trascrizionali oncogeni in diversi contesti tumorali, rendendolo un nodo utile per lo studio della riprogrammazione dello sviluppo. L’analisi sperimentale di HOXB3 supporta la ricerca sulle reti di regolazione genica, sul controllo epigenetico del destino cellulare e sulla funzione dei fattori di trascrizione dipendente dal contesto.
HoxB3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXB3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXB3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXB3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXB3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.