HoxB13 Plasmide Double Nickase (h): sc-401878-NIC

HOXB13 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxB13, un regolatore di legame al DNA specifico per sequenza che contribuisce a stabilire la patterning antero‑posteriore e controlla i programmi di differenziamento nelle linee urogenitali e prostatiche. Modulando le reti trascrizionali a valle delle vie di segnalazione dello sviluppo, HoxB13 influenza le decisioni di destino cellulare, la maturazione epiteliale e l’espressione genica specifica di tessuto. Un’attività di HOXB13 deregolata e circuiti trascrizionali alterati sono stati collegati alla biologia della prostata e alla riprogrammazione oncogenica, rendendolo un bersaglio rilevante per lo studio della plasticità di linea e degli stati regolatori dell’espressione genica associati al tumore. Nella ricerca biomedica, HOXB13 viene comunemente studiato per i suoi ruoli nel controllo trascrizionale, nella regolazione dipendente dalla cromatina e negli effetti contestuali su proliferazione e differenziamento.

HoxB13 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXB13 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXB13. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXB13. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXB13 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.