HMX2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420886

Panoramica

Hmx2 codifica il fattore di trascrizione homeobox HMX2, una proteina nucleare legante il DNA che regola programmi di espressione genica durante lo sviluppo embrionale. Nel topo, HMX2 è implicato nel patterning e nella differenziazione delle strutture sensoriali, con ruoli di rilievo nella morfogenesi dell’orecchio interno e nella formazione del sistema vestibolare attraverso il controllo trascrizionale della specificazione di linea. Coordinando reti trascrizionali dello sviluppo, HMX2 influenza le decisioni di destino cellulare, l’architettura dei tessuti e la maturazione di epiteli specializzati. L’alterazione delle vie correlate a Hmx2 è rilevante per lo studio di difetti congeniti che colpiscono udito ed equilibrio, nonché di meccanismi più ampi di disregolazione dello sviluppo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO HMX2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Hmx2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Hmx2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Hmx2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina HMX2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Hmx2 per lo studio della segnalazione di HMX2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Hmx2 critici per la funzione di HMX2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Hmx2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal HMX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal HMX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Hmx2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal HMX2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR HMX2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Hmx2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Hmx2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.