Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Histone H10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420754
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histone H10 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Histone H10, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Histone H10 Antibody (34): sc-56695
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histone H10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-420754 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino H1f0 codifica l’istone H1⁰, un istone linker associato alla differenziazione che si lega al DNA nucleosomiale per stabilizzare la compattazione della cromatina di ordine superiore e influenzare l’accessibilità del genoma. Modulando la spaziatura dei nucleosomi e la dinamica della cromatina, H1⁰ contribuisce al controllo epigenetico dei programmi trascrizionali durante l’uscita dal ciclo cellulare, l’impegno di linea e la senescenza cellulare. Alterazioni dell’abbondanza o della distribuzione di H1⁰ sono state collegate a cambiamenti dello stato della cromatina, della stabilità del genoma e a una regolazione trascrizionale aberrante osservata nella biologia dei tumori e in altri disturbi che comportano una differenziazione compromessa. In quanto proteina architetturale della cromatina, H1⁰ è spesso studiato in vie che regolano l’organizzazione dell’eterocromatina, le risposte al danno al DNA e la regolazione genica a lungo raggio.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Histone H10 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene H1f0 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del H1f0 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto H1f0 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Histone H10.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di H1f0 per lo studio della segnalazione di Histone H10, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni H1f0 critici per la funzione di Histone H10
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di H1f0 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Histone H10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Histone H10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus H1f0. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Histone H10 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Histone H10 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia H1f0 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio H1f0 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.