Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Plasmide Double Nickase (m): sc-436647-NIC

Il gene murino **Hdac1** codifica l’istone deacetilasi 1 (HDAC1), una deacetilasi istonica (HDAC) di classe I che rimuove i gruppi acetile dai residui di lisina sulle code degli istoni, promuovendo la compattazione della cromatina e la repressione trascrizionale. HDAC1 opera all’interno di complessi corepressori multiproteici quali Sin3, NuRD e CoREST, integrando segnali che regolano la progressione del ciclo cellulare, la replicazione e la riparazione del DNA, nonché programmi di differenziamento specifici di linea. Coordinando il silenziamento epigenetico su promotori ed enhancer, HDAC1 contribuisce a mantenere la stabilità del genoma e a modellare le risposte cellulari allo stress e ai segnali dello sviluppo. Un’attività di HDAC1 deregolata è spesso associata a programmi trascrizionali aberranti osservati in diversi modelli rilevanti per la malattia, inclusi la trasformazione oncogena e fenotipi neuro-sviluppativi.

Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Hdac1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Hdac1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Hdac1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Hdac1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.