Hepatic Lipase Plasmide Double Nickase (h): sc-403928-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Hepatic Lipase Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Hepatic Lipase Double Nickase Plasmid (h) e il Hepatic Lipase Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LIPC. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Hepatic Lipase Antibody (XHL3-6): sc-21740
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Hepatic Lipase Plasmide Double Nickase (h) | sc-403928-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hepatic Lipase Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403928-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **LIPC** codifica la **lipasi epatica**, una lipasi endoteliale legata alla superficie cellulare che idrolizza trigliceridi e fosfolipidi nelle lipoproteine circolanti, influenzando il rimodellamento delle HDL e la conversione delle IDL in LDL. Regolando la composizione e la clearance delle lipoproteine, la lipasi epatica integra il trasporto dei lipidi con le vie di captazione epatica e contribuisce all’omeostasi energetica sistemica. Alterazioni dell’attività o dell’espressione di **LIPC** sono state associate a fenotipi di dislipidemia, inclusi cambiamenti nei livelli di colesterolo HDL e nella distribuzione delle particelle lipidiche, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici del metabolismo lipidico. **LIPC** è inoltre studiato nel contesto delle vie di rischio cardiometabolico e degli effetti gene-ambiente sui profili lipidici plasmatici.
Hepatic Lipase Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LIPC nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LIPC. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LIPC. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LIPC interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.