GPR55 Plasmide Double Nickase (h): sc-411265-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPR55 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPR55 Double Nickase Plasmid (h) e il GPR55 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GPR55. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPR55 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411265-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR55 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411265-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR55 codifica un recettore atipico accoppiato a proteina G (GPCR) che risponde a ligandi di origine lipidica e si accoppia a molteplici vie mediate da proteine G per regolare la segnalazione intracellulare del Ca²⁺, il rimodellamento del citoscheletro dipendente da RhoA/ROCK e l’attivazione di MAPK/ERK. Nelle cellule umane, la segnalazione di GPR55 influenza la migrazione cellulare, la proliferazione e le risposte infiammatorie, con ruoli descritti nella funzione delle cellule immunitarie e nel crosstalk con reti correlate al sistema endocannabinoide. Alterazioni dell’espressione o della segnalazione di GPR55 sono state associate, in vari studi, all’invasività delle cellule tumorali, alla segnalazione del dolore neuropatico, alla regolazione metabolica e all’omeostasi ossea, rendendolo un bersaglio utile per analizzare la biologia dei GPCR mediata da lipidi. Queste caratteristiche ne supportano l’impiego come nodo di via per ricerche meccanicistiche in farmacologia dei GPCR e nei programmi trascrizionali e fenotipici a valle.
GPR55 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GPR55 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GPR55. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GPR55. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GPR55 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.