GPR54 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403766-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR54O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR54 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR54 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KISS1R. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR54 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403766-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR54 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403766-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KISS1R codifica o receptor acoplado à proteína G GPR54 (também conhecido como KISS1R), um receptor de alta afinidade para as kisspeptinas que regula a atividade dos neurônios de GnRH e faz a ligação entre sinais metabólicos e de desenvolvimento e a ativação do eixo hipotálamo–hipófise–gônadas. Após a ligação do ligante, o GPR54 sinaliza principalmente por meio de Gαq/11 para estimular a fosfolipase C, a mobilização intracelular de Ca²⁺ e a atividade da via MAPK/ERK a jusante, influenciando a expressão gênica e a secreção neuroendócrina. Alterações na sinalização de KISS1R estão associadas a fenótipos endócrinos reprodutivos, incluindo hipogonadismo hipogonadotrófico e distúrbios do tempo puberal, e o receptor tem sido estudado por possíveis papéis em programas de migração e invasão celular em diversos sistemas modelo. Essas características tornam o KISS1R um alvo útil para investigar a sinalização de cálcio mediada por GPCR, a regulação neuroendócrina e o crosstalk entre vias em células humanas.
GPR54 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KISS1R em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KISS1R. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KISS1R. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KISS1R interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.