GPR40 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-433245-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR40O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR40 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GPR40 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ffar1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR40 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-433245-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Ffar1** de camundongo codifica o **GPR40**, um receptor acoplado à proteína G ativado por ácidos graxos livres de cadeia média e longa, que conecta a detecção de nutrientes à sinalização intracelular. Nas ilhotas pancreáticas e em outros tecidos metabólicos, o GPR40 acopla-se principalmente a **Gq/11** para estimular a **fosfolipase C**, elevar o **Ca²⁺ intracelular** e ativar vias de **MAPK**, moldando o acoplamento estímulo-secreção e programas transcricionais mais amplos responsivos a lipídios. Esse receptor participa da regulação, dependente de ácidos graxos, da homeostase da glicose e se cruza com vias implicadas em estresse metabólico, lipotoxicidade e inflamação. Alterações na sinalização **FFAR1/GPR40** têm sido estudadas no contexto da desregulação da insulina associada à obesidade e de fenótipos metabólicos relacionados em modelos murinos.
GPR40 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ffar1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ffar1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ffar1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ffar1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.