GPR142 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-415656
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR142 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPR142, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR142 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-415656 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GPR142 codifica o recetor acoplado à proteína G 142, um GPCR órfão/classe A enriquecido em tecidos metabolicamente relevantes e associado à deteção de nutrientes. Após ativação, o GPR142 acopla-se a proteínas G heterotriméricas para regular a sinalização de segundos mensageiros e vias dependentes de cálcio que influenciam a secreção hormonal e a homeostase metabólica mais ampla. Estudos transcricionais e genéticos associaram o GPR142 a fenótipos endócrinos e metabólicos, incluindo vias relevantes para a regulação da glicose e a função das ilhotas pancreáticas. Como recetor de superfície celular, constitui um alvo acessível para dissecar a sinalização de GPCR, a descoberta de ligandos e programas transcricionais conduzidos pelo recetor.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR142 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GPR142 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GPR142, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GPR142 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR142.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GPR142 para a investigação da sinalização de GPR142, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GPR142 críticos para a função GPR142
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GPR142 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPR142 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPR142 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GPR142. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR142 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPR142 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GPR142 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GPR142 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.