GPR126 Plasmide Double Nickase (m): sc-432032-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPR126 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPR126 Double Nickase Plasmid (m) e il GPR126 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Adgrg6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPR126 Plasmide Double Nickase (m) | sc-432032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR126 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-432032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adgrg6 codifica per il recettore di adesione accoppiato a proteine G (GPCR) GPR126, un recettore di membrana che integra segnali provenienti dalla matrice extracellulare con la segnalazione intracellulare mediata da proteine G per regolare programmi trascrizionali dipendenti dal cAMP. Nel topo, GPR126 è essenziale per lo sviluppo delle cellule di Schwann e per la mielinizzazione dei nervi periferici, e contribuisce anche alla morfogenesi cardiaca e allo sviluppo scheletrico. Attraverso vie mediate da GPCR e interazioni con ligandi del dominio di adesione, GPR126 influenza la differenziazione cellulare, la migrazione e l’organizzazione dei tessuti. L’alterazione della funzione di ADGRG6/GPR126 è stata collegata a difetti dello sviluppo e a fenotipi rilevanti per la malattia nei sistemi nervoso e muscoloscheletrico, supportando studi meccanicistici sulla mielinizzazione e sulla morfogenesi.
GPR126 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Adgrg6 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Adgrg6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Adgrg6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Adgrg6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.