galectin-6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421418

Panoramica

Il gene murino **Lgals6** codifica la **galectina-6**, una lectina legante i β-galattosidi implicata in eventi di riconoscimento dipendenti dai carboidrati sulla superficie cellulare e nel microambiente extracellulare. In quanto membro della famiglia delle galectine, la galectina-6 può influenzare le interazioni cellula–cellula e cellula–matrice, l’organizzazione del reticolo di glicoproteine e processi a valle quali la regolazione della barriera epiteliale e la segnalazione delle cellule immunitarie. Le vie guidate dalle galectine sono comunemente collegate alla modulazione dell’infiammazione, al reclutamento leucocitario e al rimodellamento tissutale tramite interazioni con recettori glicosilati e componenti della matrice extracellulare. Una segnalazione lectina–glicano deregolata è stata associata a fenotipi infiammatori e fibrotici in molteplici tessuti, rendendo **Lgals6** un bersaglio rilevante per studi meccanicistici di immunobiologia mucosale e di regolazione del microambiente.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO galectin-6 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Lgals6 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Lgals6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Lgals6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina galectin-6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Lgals6 per lo studio della segnalazione di galectin-6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Lgals6 critici per la funzione di galectin-6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Lgals6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal galectin-6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal galectin-6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Lgals6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal galectin-6 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR galectin-6 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Lgals6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Lgals6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.