GABP-β1/2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404040-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABP-β1/2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GABP-β1/2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GABP-β1/2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GABPB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GABP-β1/2 Anticorpo (E-7): sc-271571
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABP-β1/2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABP-β1/2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína de ligação a GA, subunidade beta 1 (GABPB1), codifica o parceiro β1/β2 que heterodimeriza com a GABPA para formar o fator de transcrição GABP, da família ETS, o qual se liga a elementos promotores ricos em GA e coordena programas de expressão gênica que controlam a progressão do ciclo celular, a biogênese mitocondrial e a proteostase. Os complexos GABP regulam genes mitocondriais codificados no núcleo e a capacidade de fosforilação oxidativa, além de contribuírem para o controle transcricional da manutenção dos telômeros por meio da regulação do promotor de TERT. Por meio dessas funções, o GABPB1 se conecta a vias que governam o metabolismo celular, a adaptação ao estresse e redes transcricionais específicas de linhagem. A desregulação da sinalização de GABP e alterações no resultado transcricional dependente de GABPB1 têm sido implicadas em contextos de biologia tumoral e em distúrbios com defeitos mitocondriais ou de controle transcricional, sustentando estudos mecanísticos de regulação gênica e aptidão celular.
GABP-β1/2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GABPB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GABPB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GABPB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GABPB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.