Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
GABAA Rα1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401038-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GABAA Rα1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GABAA Rα1 Double Nickase Plasmid (h) e il GABAA Rα1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GABRA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GABAA Rα1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401038-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rα1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401038-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRA1 codifica la subunità α1 del recettore umano GABA\(_A\), un componente fondamentale dei canali del cloro pentamerici attivati da ligando che mediano la rapida neurotrasmissione inibitoria nel sistema nervoso centrale. Attraverso l’assemblaggio con subunità β e γ, GABA\(_A\) Rα1 determina la cinetica di gating del canale, la localizzazione sinaptica dei recettori e l’eccitabilità delle reti neuronali a valle della segnalazione delle sinapsi GABAergiche. La sua attività influisce su processi quali la plasticità sinaptica, il funzionamento dei circuiti oscillatori e l’equilibrio tra eccitazione e inibizione. Alterazioni genetiche e funzionali di GABRA1 sono state associate a fenotipi di tipo neuroevolutivo e correlati alle crisi epilettiche, a sostegno della sua rilevanza per studi meccanicistici della disfunzione della segnalazione inibitoria.
GABAA Rα1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GABRA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GABRA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GABRA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GABRA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.