FPR2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401738-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FPR2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FPR2 Double Nickase Plasmid (h) e il FPR2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FPR2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FPR2 Antibody (GM1D6): sc-57141
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FPR2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401738-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FPR2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401738-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il recettore 2 per peptidi formilati (FPR2) è un recettore umano accoppiato a proteine G (GPCR) che rileva peptidi N-formilati e diversi mediatori lipidici, collegando segnali chemioattrattanti extracellulari alla segnalazione intracellulare. Una volta attivato, ingaggia vie dipendenti da Gi che regolano la mobilizzazione del calcio, le cascate MAPK, la segnalazione PI3K e processi associati a β-arrestina, modellando la chemiotassi leucocitaria, la degranulazione, la produzione di citochine e l’attivazione dei fagociti. FPR2 partecipa alla sorveglianza immunitaria innata e alla risoluzione dell’infiammazione attraverso una segnalazione influenzata dal ligando (ligand-biased), integrando programmi pro-infiammatori e pro-risolutivi. Una segnalazione di FPR2 deregolata è stata implicata in condizioni infiammatorie croniche, nelle risposte immunitarie legate alle infezioni e nell’infiammazione associata ai tumori, rendendolo un nodo utile per analizzare il comportamento delle cellule mieloidi e il crosstalk tra vie infiammatorie.
FPR2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FPR2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FPR2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FPR2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FPR2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.