Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FKBP8 Plasmide Double Nickase (h): sc-403075-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FKBP8 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FKBP8 Double Nickase Plasmid (h) e il FKBP8 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FKBP8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FKBP8 Antibody (C-10): sc-166607
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FKBP8 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403075-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKBP8 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403075-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP8 codifica la FK506-binding protein 8 (FKBP38), un’immunofilina ancorata alla membrana che si localizza principalmente nei siti di contatto tra mitocondri e reticolo endoplasmatico. Funziona come isomerasi peptidil-prolil cis-trans e come chaperone molecolare, modulando il ripiegamento e la stabilità delle proteine e influenzando al contempo la segnalazione anti-apoptotica attraverso interazioni con membri della famiglia BCL2. FKBP8 partecipa al controllo di qualità mitocondriale e a processi legati all’autofagia, collegando l’omeostasi degli organelli alle risposte cellulari allo stress. Un’espressione o una funzione deregolate di FKBP8 sono state associate ad alterazioni della proteostasi e della sensibilità all’apoptosi in contesti rilevanti per la biologia dei tumori e la ricerca sulla neurodegenerazione.
FKBP8 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FKBP8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FKBP8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FKBP8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FKBP8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.