FKBP51 Plasmide Double Nickase (h): sc-401560-NIC

FKBP5 codifica per l’immunofillina FKBP51, una peptidil-prolil cis-trans isomerasi che funge da co-chaperone di HSP90 e modula la segnalazione dei recettori per gli ormoni steroidei, inclusi i complessi recettoriali dei glucocorticoidi, degli androgeni e del progesterone. Attraverso interazioni con i complessi recettoriali e con intermedi della segnalazione, FKBP51 influenza programmi trascrizionali responsivi allo stress e si integra con vie come MAPK e NF-κB, che modellano l’infiammazione e la sopravvivenza cellulare. FKBP51 incide anche sulla proteostasi e su processi legati all’autofagia regolando il ripiegamento proteico e il traffico dei recettori. Un’espressione alterata di FKBP5 o varianti regolatorie sono state associate a risposte allo stress disfunzionali e alla biologia di malattie neuropsichiatriche e infiammatorie, rendendolo un nodo ampiamente studiato nel dialogo tra sistema endocrino e immunitario.

FKBP51 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FKBP5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FKBP5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FKBP5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FKBP5 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.