FBL16 Plasmide Double Nickase (h): sc-414575-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FBL16 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FBL16 Double Nickase Plasmid (h) e il FBL16 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FBXL16. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FBL16 Plasmide Double Nickase (h) | sc-414575-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FBL16 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-414575-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FBXL16 (FBL16) codifica una proteina F-box che si prevede funzioni come componente di riconoscimento del substrato dei complessi ligasi E3 dell’ubiquitina di tipo SCF (SKP1–CUL1–RBX1), influenzando così il turnover proteasomiale dei bersagli dipendente dall’ubiquitina. Attraverso questo ruolo, FBXL16 è collegata alla regolazione dell’omeostasi proteica e degli output di segnalazione cellulare che dipendono dalla degradazione tempestiva degli effettori di via. La modulazione dell’attività SCF/F-box può influenzare la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e i programmi trascrizionali alterando la stabilità di proteine regolatorie. La disregolazione dei componenti della via ubiquitina–proteasoma, inclusi gli adattatori F-box, è frequentemente associata a stati di segnalazione alterati osservati nel cancro e in altri disturbi caratterizzati da uno squilibrio della proteostasi.
FBL16 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FBXL16 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FBXL16. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FBXL16. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FBXL16 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.