Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
FATE1 Plasmide Double Nickase (h): sc-413809-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FATE1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FATE1 Double Nickase Plasmid (h) e il FATE1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FATE1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FATE1 Antibody (B5-9): sc-101220
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FATE1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413809-NIC | 20 µg | $410.00 |
FATE1 (fetal and adult testis-expressed 1) codifica una proteina associata ai mitocondri, arricchita nel testicolo e frequentemente sovraespressa in molteplici contesti tumorali, dove può influenzare la tolleranza cellulare allo stress. È stato riportato che localizza nei siti di contatto tra mitocondri e reticolo endoplasmatico; FATE1 è stata collegata alla regolazione del trasferimento di calcio, della dinamica della membrana mitocondriale e delle vie di segnalazione apoptotiche. Modulando il dialogo tra organelli e la suscettibilità mitocondriale allo stress, FATE1 può influenzare programmi di proliferazione e sopravvivenza rilevanti per la biologia del cancro. Queste proprietà rendono FATE1 un bersaglio utile per studiare la regolazione mitocondriale, l’ancoraggio RE–mitocondri e le reti di risposta allo stress nelle cellule umane.
FATE1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FATE1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FATE1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FATE1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FATE1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.