FANCD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431756-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FANCD2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FANCD2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase FANCD2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Fancd2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FANCD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431756-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FANCD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431756-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Fancd2 codifica a FANCD2, um efetor central da via de reparo de ligações cruzadas interfitas (ICL) do DNA na anemia de Fanconi (AF), que protege a estabilidade do genoma durante o estresse replicativo. Após dano ao DNA, a FANCD2 é monoubiquitinada em conjunto com a FANCI e recrutada para forquilhas de replicação estagnadas, coordenando o processamento nucleolítico, a recombinação homóloga e interações com fatores de reparo associados a BRCA. Essa atividade sustenta o controle do checkpoint da fase S, limita quebras cromossômicas e preserva a integridade das forquilhas de replicação. A disrupção do reparo dependente de FANCD2 está ligada à biologia da anemia de Fanconi e à hipersensibilidade a agentes que induzem ligações cruzadas, tornando Fancd2 um locus-chave para estudar o reparo do DNA acoplado à replicação e a manutenção do genoma em modelos murinos.
FANCD2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Fancd2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Fancd2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Fancd2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Fancd2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.