Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ERRα Plasmide Double Nickase (h): sc-401772-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ERRα Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ERRα Double Nickase Plasmid (h) e il ERRα Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ESRRA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ERRα Antibody (2ERR2): sc-65718
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ERRα Plasmide Double Nickase (h) | sc-401772-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERRα Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401772-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESRRA codifica il recettore alfa correlato agli estrogeni (ERRα), un recettore nucleare orfano che funge da regolatore trascrizionale della biogenesi mitocondriale e del metabolismo ossidativo. ERRα coopera con coattivatori come PPARGC1A/PGC-1α per controllare programmi genici coinvolti nell’ossidazione degli acidi grassi, nella fosforilazione ossidativa e nell’omeostasi energetica cellulare. Attraverso l’integrazione con le vie di segnalazione AMPK, mTOR e quelle sensibili all’ipossia, ERRα influenza l’adattamento metabolico, la proliferazione e la differenziazione in molteplici tessuti. Un’attività di ESRRA deregolata è stata associata a fenotipi metabolici alterati ed è stata studiata in contesti che includono il metabolismo tumorale, la disfunzione cardiometabolica e la biologia di muscolo e osso.
ERRα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ESRRA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ESRRA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ESRRA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ESRRA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.