ELOVL4 Plasmide Double Nickase (h): sc-407562-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ELOVL4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ELOVL4 Double Nickase Plasmid (h) e il ELOVL4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ELOVL4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ELOVL4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407562-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ELOVL4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407562-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL4 codifica un’elongasi localizzata nel reticolo endoplasmatico che catalizza la sintesi di acidi grassi a catena molto lunga, inclusi substrati necessari per lipidi specializzati come quelli della retina e dell’epidermide. Estendendo gli acil-CoA a catena lunga, ELOVL4 contribuisce all’omeostasi lipidica, alla composizione delle membrane e alla funzione di barriera, influenzando vie collegate al metabolismo di sfingolipidi e fosfolipidi. L’alterazione dell’attività di ELOVL4 modifica i pool di lipidi a catena molto lunga ed è stata associata a fenotipi di degenerazione retinica ereditaria e a disturbi neurocutanei, evidenziandone la rilevanza per l’integrità dei fotorecettori e la fisiologia cutanea. In quanto nodo metabolico all’interfaccia tra l’allungamento degli acidi grassi e il rimodellamento lipidico degli organelli, ELOVL4 è spesso studiato in contesti di stress lipidico, biofisica delle membrane e requisiti lipidici specifici dei tessuti.
ELOVL4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ELOVL4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ELOVL4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ELOVL4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ELOVL4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.