DPF2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404801-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DPF2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DPF2 Double Nickase Plasmid (h) e il DPF2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DPF2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DPF2 Antibody (C-9): sc-514297
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DPF2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404801-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DPF2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404801-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DPF2 (double PHD fingers 2; noto anche come BAF45d) è un adattatore associato alla cromatina che riconosce i marcatori istonici tramite i suoi domini PHD a dito di zinco e contribuisce a indirizzare i complessi di rimodellamento della cromatina SWI/SNF (BAF) verso specifici loci genomici. Accoppiando i segnali epigenetici al riposizionamento dei nucleosomi, DPF2 partecipa a programmi di regolazione trascrizionale che modellano il controllo del ciclo cellulare, la differenziazione e l’espressione genica in risposta agli stimoli. Il rimodellamento della cromatina dipendente da DPF2 si interseca con vie che governano reti geniche dello sviluppo e risposte trascrizionali associate al danno al DNA. La disregolazione dei componenti SWI/SNF e delle funzioni di “lettura” della cromatina, incluse le attività associate a DPF2, è spesso studiata nel contesto degli stati trascrizionali alterati osservati nel cancro e in altri disturbi con perturbazioni epigenetiche.
DPF2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DPF2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DPF2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DPF2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DPF2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.