CYP4A10 Plasmide Double Nickase (m): sc-419927-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP4A10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP4A10 Double Nickase Plasmid (m) e il CYP4A10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cyp4a10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP4A10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419927-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP4A10 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419927-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cyp4a10 codifica l’enzima del citocromo P450 murino CYP4A10, una monoossigenasi associata al reticolo endoplasmatico che catalizza l’ω-idrossilazione di acidi grassi a catena media e dell’acido arachidonico, generando eicosanoidi bioattivi come il 20-HETE. Attraverso queste reazioni, CYP4A10 influenza l’omeostasi lipidica, i programmi metabolici regolati da PPARα e il metabolismo ossidativo renale ed epatico. Alterazioni dell’attività di Cyp4a10 sono state collegate a vie che influenzano il tono vascolare, la gestione del sodio e la segnalazione infiammatoria, rendendolo rilevante per studi su fenotipi cardiometabolici e renali. Modelli in vivo e basati su cellule utilizzano la perturbazione di Cyp4a10 per chiarire come l’ossidazione degli acidi grassi e la produzione di eicosanoidi plasmino la fisiologia tissutale e le risposte allo stress.
CYP4A10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cyp4a10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cyp4a10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cyp4a10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cyp4a10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.