CYP11B2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405281-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP11B2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP11B2 Double Nickase Plasmid (h) e il CYP11B2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CYP11B2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP11B2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP11B2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP11B2 codifica l’aldosterone sintasi, un enzima mitocondriale del citocromo P450 che catalizza le fasi terminali di ossidazione che convertono l’11-desossicorticosterone in aldosterone nelle cellule della zona glomerulosa del surrene. La sua attività collega la steroidogenesi derivata dal colesterolo al sistema renina–angiotensina–aldosterone, integrando il trasferimento elettronico mitocondriale, la monoossigenazione dipendente dall’eme e il controllo endocrino dell’omeostasi di elettroliti e pressione arteriosa. Un’espressione o un’attività deregolata di CYP11B2 è associata a condizioni di eccesso di aldosterone, tra cui l’iperaldosteronismo primario e gli adenomi surrenalici produttori di aldosterone, e contribuisce alla fisiopatologia cardiovascolare e renale. In quanto marcatore e motore della biosintesi dei mineralcorticoidi, CYP11B2 è ampiamente studiato nella differenziazione delle cellule surrenaliche, nella segnalazione dell’angiotensina II e nel flusso metabolico degli steroidi.
CYP11B2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CYP11B2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CYP11B2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CYP11B2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CYP11B2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.