CYP11B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419894
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP11B2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CYP11B2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP11B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419894 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cyp11b2 codifica o CYP11B2 (sintase da aldosterona), uma enzima mitocondrial do citocromo P450 que catalisa as etapas finais da biossíntese de aldosterona a partir da desoxicorticosterona. Essa atividade integra a via esteroidogênica, acoplando a transferência de elétrons da adrenodoxina/redutase de adrenodoxina a reações oxidativas que regulam a produção de mineralocorticoides e, a jusante, a homeostase de eletrólitos e de fluidos. Em células da zona glomerulosa da adrenal de camundongos, o CYP11B2 integra sinais hormonais, incluindo programas dependentes de cálcio e responsivos à angiotensina II, para ajustar a produção de esteroides. A expressão desregulada de Cyp11b2 ou o excesso de aldosterona estão associados a alterações maladaptativas na fisiologia cardiovascular e renal, tornando esse gene relevante para estudos mecanísticos do controle endócrino e do remodelamento metabólico responsivo ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CYP11B2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cyp11b2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cyp11b2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cyp11b2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CYP11B2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cyp11b2 para a investigação da sinalização de CYP11B2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cyp11b2 críticos para a função CYP11B2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cyp11b2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CYP11B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CYP11B2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cyp11b2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CYP11B2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CYP11B2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cyp11b2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cyp11b2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.