CD96 Plasmide Double Nickase (h): sc-407300-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD96 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD96 Double Nickase Plasmid (h) e il CD96 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CD96. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD96 Antibody (NK92.50.1): sc-53574
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD96 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407300-NIC | 20 µg | $410.00 |
CD96 codifica un recettore di tipo I transmembrana della superfamiglia delle immunoglobuline, espresso su sottopopolazioni di cellule T e cellule NK, dove modula la formazione della sinapsi immunitaria e la funzione effettrice attraverso interazioni con ligandi della famiglia nectina/nectina-like come CD155 (PVR) e CD111 (NECTIN1). Integrando segnali all’interno di reti di adesione e di co-inibizione/co-stimolazione, CD96 influenza la citotossicità, la produzione di citochine e le soglie di attivazione dei linfociti nel microambiente tumorale. Un’alterata attività di CD96 è stata associata all’elusione immunitaria e a cambiamenti dell’immunità antitumorale, ed è spesso studiata insieme a vie di checkpoint, tra cui TIGIT e CD226, che competono per ligandi condivisi. Queste caratteristiche rendono CD96 un bersaglio utile per analizzare i circuiti di regolazione immunitaria rilevanti per l’immunologia del cancro e la ricerca sulle malattie infiammatorie.
CD96 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD96 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD96. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD96. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD96 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.