Plasmide Double Nickase (h) CD96: sc-407300-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD96 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD96 Double Nickase (h) et le plasmide CD96 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD96. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD96 Antibody (NK92.50.1): sc-53574
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD96 | sc-407300-NIC | 20 µg | $410.00 |
CD96 code un récepteur de la superfamille des immunoglobulines, transmembranaire de type I, exprimé sur certaines sous-populations de lymphocytes T et de cellules NK, où il module la formation de la synapse immunologique et la fonction effectrice via des interactions avec des ligands de type nectine/nectine-like tels que CD155 (PVR) et CD111 (NECTIN1). En intégrant des signaux au sein des réseaux d’adhésion et de co‑inhibition/co‑stimulation, CD96 influence la cytotoxicité, la production de cytokines et les seuils d’activation des lymphocytes dans le microenvironnement tumoral. Une activité altérée de CD96 a été associée à l’échappement immunitaire et à des modifications de l’immunité antitumorale, et il est fréquemment étudié en parallèle de voies de checkpoint, notamment TIGIT et CD226, qui entrent en compétition pour des ligands communs. Ces caractéristiques font de CD96 une cible utile pour disséquer les circuits de régulation immunitaire pertinents en immunologie du cancer et en recherche sur les maladies inflammatoires.
CD96 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD96 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD96. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD96. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD96.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.