Plasmide Double Nickase (h) CD79A: sc-401827-NIC

CD79A code la sous-unité Ig-α du complexe du récepteur de l’antigène des lymphocytes B (BCR), formant avec CD79B un hétérodimère de signalisation qui couple la reconnaissance de l’antigène à des cascades d’activation intracellulaire. Grâce à ses motifs d’activation à base de tyrosine de type immunorécepteur (ITAM), CD79A permet le recrutement de SYK dépendant de la phosphorylation et la propagation de voies en aval, notamment PI3K–AKT, NF-κB et MAPK, orientant le développement, l’activation et la survie des lymphocytes B. Une expression altérée de CD79A ou une compétence de signalisation perturbée est associée à des réseaux de signalisation du BCR dérégulés, impliqués dans les immunodéficiences des lymphocytes B et la biologie des hémopathies malignes d’origine B. En tant que marqueur restreint à la lignée, CD79A est également largement utilisé pour étudier l’identité des lymphocytes B, leurs états de différenciation et les réponses de signalisation induites par l’antigène dans des modèles immunitaires humains.

CD79A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD79A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD79A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD79A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD79A.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.