Plasmide Double Nickase (h) CD30: sc-402068-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CD30 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CD30 Double Nickase (h) et le plasmide CD30 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TNFRSF8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD30 Antibody (C-3): sc-46683
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CD30 | sc-402068-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CD30 | sc-402068-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF8 code pour CD30, un membre de la superfamille des récepteurs du TNF exprimé à la surface des lymphocytes T et B activés, et qui agit comme récepteur de costimulation inductible. La liaison de CD30 favorise le recrutement des adaptateurs TRAF et l’activation en aval des voies de signalisation NF-κB, MAPK/ERK et JNK, modulant la production de cytokines, la prolifération et la mort cellulaire induite par l’activation selon le contexte cellulaire. Une expression et une signalisation de CD30 dérégulées sont étroitement associées aux états d’activation lymphoïde et sont largement étudiées dans le lymphome de Hodgkin et le lymphome anaplasique à grandes cellules, en tant que marqueurs de programmes de signalisation immunitaire altérés. En tant que récepteur de surface intégrant des signaux inflammatoires, CD30 est également pertinent pour l’étude des interactions avec le microenvironnement immunitaire et de la reprogrammation transcriptionnelle dans les lymphocytes malins et activés.
CD30 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TNFRSF8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TNFRSF8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TNFRSF8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TNFRSF8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.