CD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-402105-NIC

CD2 codifica un recettore di adesione e di segnalazione di superficie cellulare della superfamiglia delle immunoglobuline, altamente espresso sui linfociti T e sulle cellule NK, dove lega ligandi come CD58 per stabilizzare la formazione della sinapsi immunologica. CD2 co-stimola la segnalazione del recettore dei linfociti T (TCR) e modula le vie a valle che controllano il flusso di calcio, l’attivazione delle MAPK, il rimodellamento del citoscheletro e la produzione di citochine. Attraverso queste funzioni, CD2 contribuisce allo sviluppo dei linfociti, all’attivazione guidata dall’antigene e alla comunicazione cellula–cellula nei tessuti infiammati. Una segnalazione e un’adesione mediate da CD2 disregolate sono state implicate in contesti di disfunzione immunitaria, incluse l’autoimmunità e la biologia delle neoplasie ematologiche, rendendolo un nodo rilevante per studi di immunologia meccanicistica.

CD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.