CBX8 Plasmide Double Nickase (h): sc-407903-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CBX8 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CBX8 Double Nickase Plasmid (h) e il CBX8 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CBX8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CBX8 Antibody (C-3): sc-374332
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CBX8 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CBX8 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBX8 (chromobox 8) è una proteina del gruppo Polycomb che funziona come “lettore” della cromatina all’interno del complesso repressivo canonico Polycomb 1 (PRC1), riconoscendo i segni istonici repressivi e contribuendo al mantenimento dei programmi di silenziamento trascrizionale. Attraverso la compattazione della cromatina mediata da PRC1 e la regolazione dell’ubiquitinazione degli istoni, CBX8 contribuisce a un controllo stabile dei geni dello sviluppo, dell’identità cellulare e degli stati trascrizionali legati al ciclo cellulare. Un’attività deregolata di CBX8 è stata associata a paesaggi epigenetici alterati che influenzano proliferazione, differenziazione e vie correlate alla senescenza in molteplici contesti patologici. Il suo ruolo nella repressione trascrizionale rende CBX8 un bersaglio utile per studiare come la regolazione della cromatina dipendente da Polycomb plasmi le reti geniche.
CBX8 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CBX8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CBX8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CBX8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CBX8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.