C/EBP beta Plasmide Double Nickase (m): sc-419623-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C/EBP beta Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C/EBP beta Double Nickase Plasmid (m) e il C/EBP beta Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cebpb. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: C/EBP beta Antibody (H-7): sc-7962
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C/EBP beta Plasmide Double Nickase (m) | sc-419623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C/EBP beta Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Cebpb** codifica **C/EBP beta**, un fattore di trascrizione della famiglia **basic leucine zipper (bZIP)** che coordina programmi inducibili di espressione genica in risposta a segnali infiammatori, stress metabolico e stimoli di differenziamento. C/EBP beta integra input provenienti dalle vie delle citochine e dei recettori Toll-like e coopera con fattori quali **NF-κB** e **STAT** per regolare l’impegno della linea mieloide, le risposte di fase acuta e l’adipogenesi. La sua attività influenza il controllo del ciclo cellulare, la sopravvivenza e il rimodellamento tissutale attraverso la regolazione trascrizionale di reti geniche immunitarie e metaboliche. Una segnalazione di C/EBP beta deregolata è spesso oggetto di studio in contesti di infiammazione cronica, disfunzione metabolica e riprogrammazione trascrizionale oncogena in modelli mammiferi.
C/EBP beta Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cebpb nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cebpb. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cebpb. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cebpb interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.