beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Plasmide Double Nickase (h): sc-410695-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Double Nickase Plasmid (h) e il beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ATP1B2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410695-NIC | 20 µg | $410.00 |
ATP1B2 codifica la subunità β2 della Na⁺/K⁺-ATPasi, un complesso ATPasico di tipo P localizzato nella membrana plasmatica che mantiene i gradienti intracellulari di Na⁺ e K⁺, essenziali per il potenziale di membrana, l’equilibrio osmotico e il trasporto attivo secondario. Oltre all’omeostasi ionica, ATP1B2 contribuisce alla maturazione delle proteine di membrana e al traffico del complesso pompa, ed è stato implicato nelle interazioni cellula–cellula e nei processi legati all’adesione, in particolare in contesti eccitabili e associati al tessuto nervoso. Modellando i gradienti elettrochimici, ATP1B2 influenza vie di segnalazione accoppiate a trasportatori iono-dipendenti e a programmi cellulari legati all’eccitabilità. Alterazioni nell’espressione o nella regolazione delle subunità della Na⁺/K⁺-ATPasi sono associate a una funzione neuronale compromessa e sono state studiate nel contesto dei meccanismi delle malattie neurologiche e delle risposte cellulari allo stress.
beta 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1B2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ATP1B2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ATP1B2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ATP1B2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ATP1B2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.