beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR Plasmide Double Nickase (h): sc-400660-NIC

ADRB1 codifica il recettore adrenergico umano β1 (β1-AR), un recettore accoppiato a proteine G che si accoppia principalmente a Gs per stimolare l’adenilato ciclasi, aumentare i livelli di cAMP e attivare programmi di fosforilazione dipendenti da PKA. Nei tessuti eccitabili e nei modelli cellulari pertinenti, la segnalazione di ADRB1 modula la gestione del calcio, le risposte contrattili ed elettrofisiologiche e la trascrizione dipendente dall’attività tramite cAMP/PKA e mediatori a valle come CREB. Il β1-AR attiva anche vie di desensibilizzazione e di traffico recettoriale attraverso GRK e β-arrestine, influenzando l’internalizzazione del recettore, la risensibilizzazione e il bias di segnalazione. Una segnalazione adrenergica disregolata che coinvolge ADRB1 è spesso studiata nel contesto della fisiopatologia cardiovascolare e della biologia della risposta allo stress, e variazioni genetiche o regolatorie in ADRB1 possono influenzare l’espressione del recettore e la dinamica della segnalazione.

beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ADRB1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ADRB1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ADRB1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ADRB1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.