ARF5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419190

개요

Arf5는 ADP-리보실화 인자 5(ARF5)를 암호화하며, ARF5는 GDP 결합 상태와 GTP 결합 상태 사이를 순환하는 소형 GTPase로서 막 수송과 소기관 역학을 조절합니다. ARF5는 골지체 및 엔도솜 막에서 소포 출아와 화물 분류를 조율하고, ARF 효과기 경로를 통해 COPI 의존적 수송, 인지질 리모델링, 액틴 연관 과정에 기여합니다. ARF5는 분비 및 엔도사이토시스 흐름을 형성함으로써 수용체 재활용, 세포내 신호전달의 구획화, 그리고 세포 스트레스 반응에 영향을 미칩니다. ARF 계열 GTPase 회로와 소포 수송 프로그램의 이상 조절은 비정상적 증식, 이동, 신경발달 관련 표현형과의 연관성 속에서 자주 연구되므로, Arf5는 질환 기전 모델에서 의미 있는 표적입니다.

ARF5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Arf5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Arf5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Arf5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ARF5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ARF5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Arf5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ARF5 기능에 중요한 Arf5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Arf5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ARF5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ARF5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Arf5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ARF5 HDR 플라스미드 (m) 및 ARF5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Arf5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Arf5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.