Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419176

Visão geral

Aqp5 codifica a Aquaporina 5 (AQP5), um canal de água de membrana que permite o rápido movimento osmótico de água através de barreiras epiteliais em tecidos secretórios, como as glândulas salivares e lacrimais e as vias aéreas. Ao regular o transporte de fluidos transepitelial e contribuir para a homeostase do volume celular epitelial, a AQP5 influencia processos como a hidratação da superfície das vias aéreas, a secreção glandular e a função de barreira. Alterações na expressão ou na localização da AQP5 têm sido associadas à desregulação do manejo de fluidos e ao remodelamento epitelial em doenças inflamatórias das vias aéreas, disfunção de glândulas exócrinas e respostas teciduais associadas a edema. Em modelos murinos, o Aqp5 é frequentemente estudado no contexto da diferenciação epitelial, do acoplamento entre transporte de íons e água e de sinalização responsiva ao estresse que molda a fisiologia das mucosas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 5/AQP5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aqp5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aqp5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aqp5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 5/AQP5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aqp5 para a investigação da sinalização de Aquaporin 5/AQP5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aqp5 críticos para a função Aquaporin 5/AQP5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aqp5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aqp5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 5/AQP5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 5/AQP5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aqp5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aqp5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.