Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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apolipoprotein E/apoE Plasmide Double Nickase (m): sc-419167-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- apolipoprotein E/apoE Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il apolipoprotein E/apoE Double Nickase Plasmid (m) e il apolipoprotein E/apoE Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Apoe. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: apolipoprotein E/apoE Antibody (F-9): sc-390925
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
apolipoprotein E/apoE Plasmide Double Nickase (m) | sc-419167-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Apoe** codifica l’apolipoproteina E (apoE), una proteina secreta che lega i lipidi e media il trasporto di colesterolo e trigliceridi associandosi alle particelle lipoproteiche e interagendo con i membri della famiglia dei recettori LDL. ApoE regola la captazione delle lipoproteine, la gestione dei lipidi nei macrofagi e la segnalazione infiammatoria, integrando vie quali la clearance delle lipoproteine, il trasporto inverso del colesterolo e le risposte della microglia nel sistema nervoso centrale. Nei modelli murini, lo stato di **Apoe** influenza fortemente la biologia della placca aterosclerotica, il metabolismo lipidico epatico e fenotipi neuroimmuni associati alla deposizione di amiloide e al mantenimento delle sinapsi. Queste funzioni rendono **Apoe** un nodo centrale per lo studio, in vivo e nelle cellule primarie, dei meccanismi delle malattie cardiometaboliche e del crosstalk tra lipidi e sistema immunitario rilevante per la neurodegenerazione.
apolipoprotein E/apoE Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Apoe nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Apoe. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Apoe. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Apoe interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.