Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Amylase Plasmide Double Nickase (h): sc-400533-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Amylase 2a Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Amylase 2a Double Nickase Plasmid (h) e il Amylase 2a Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira AMY2A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Amylase Plasmide Double Nickase (h) | sc-400533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Amylase 2a Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMY2A codifica l'α-amilasi pancreatica, un'idrolasi dei glicosidi secreta che avvia la digestione dell'amido alimentare scindendo i legami glicosidici interni α-1,4 per generare maltosio e oligosaccaridi. La sua espressione è strettamente legata all'identità delle cellule acinose e a programmi secretori regolati, integrandosi con le vie dell'esocrino pancreatico che supportano l'elaborazione dei nutrienti e l'omeostasi degli enzimi digestivi. AMY2A è comunemente utilizzato come marcatore funzionale della differenziazione esocrina pancreatica e della produzione enzimatica in modelli cellulari e organoidi. Alterazioni dell'abbondanza o dell'attività dell'amilasi vengono spesso valutate in studi sullo stress pancreatico e sugli stati infiammatori, nonché in contesti metabolici che influenzano la capacità digestiva.
Amylase 2a Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus AMY2A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di AMY2A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di AMY2A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con AMY2A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.