ADH7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-419006-KO-2

Visão geral

Adh7 codifica a álcool desidrogenase 7 (ADH7), uma oxidorredutase dependente de NAD que contribui para o metabolismo de retinoides e de uma variedade de substratos alcoóis e aldeídos, influenciando assim o equilíbrio redox celular e a capacidade de desintoxicação. Em tecidos de camundongo nos quais é expressa, a atividade da ADH7 pode se cruzar com etapas de conversão de retinol em retinal que alimentam a sinalização por ácido retinoico, uma via central para programas de diferenciação e para a homeostase epitelial. Alterações no processamento de aldeídos e no metabolismo de retinoides estão frequentemente ligadas a respostas ao estresse oxidativo e a desregulação do controle de crescimento, tornando Adh7 um alvo útil para estudar contribuições metabólicas ao remodelamento tecidual e a fenótipos relevantes para doenças. Como o metabolismo de álcool/aldeídos também impacta a sinalização lipídica e inflamatória, a perturbação de Adh7 pode ser explorada para investigar a comunicação cruzada entre enzimas metabólicas e programas transcricionais a jusante de redes reguladas por retinoides.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADH7 (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adh7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adh7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adh7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADH7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adh7 para a investigação da sinalização de ADH7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adh7 críticos para a função ADH7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adh7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ADH7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ADH7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adh7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ADH7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ADH7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adh7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adh7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.