α3e Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400023-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α3e TubulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α3e Tubulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase α3e Tubulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TUBA3E. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α3e Tubulin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400023-NIC | 20 µg | $410.00 |
TUBA3E codifica a tubulina α3e, uma subunidade dos microtúbulos que se liga à β-tubulina e sustenta a arquitetura do citoesqueleto, o transporte intracelular e a organização do fuso mitótico. Como componente central do polímero de tubulina, a tubulina α3e contribui para a dinâmica dos microtúbulos subjacente à progressão do ciclo celular, ao crescimento de prolongamentos neuronais e ao tráfego polarizado. Alterações na expressão de isotipos de tubulina ou na estabilidade dos microtúbulos podem modificar a segregação cromossômica e a motilidade celular, processos frequentemente implicados na instabilidade genômica e na biologia tumoral. Assim, TUBA3E é estudado em vias relacionadas à remodelação do citoesqueleto, à mitose e às respostas ao estresse induzido por compostos que têm os microtúbulos como alvo.
α3e Tubulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TUBA3E em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TUBA3E. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TUBA3E. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TUBA3E interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.