ZNF322A Plasmide Double Nickase (h): sc-417187-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZNF322A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZNF322A Double Nickase Plasmid (h) e il ZNF322A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZNF322. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZNF322A Plasmide Double Nickase (h) | sc-417187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZNF322A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF322 (ZNF322A) codifica un fattore di trascrizione umano a dita di zinco C2H2 contenente un dominio KRAB, implicato nel legame al DNA in modo specifico per sequenza e in programmi di repressione trascrizionale che modellano lo stato cellulare e l’espressione genica in risposta allo stress. Funzioni riportate collegano ZNF322A alla regolazione di reti trascrizionali associate a proliferazione, sopravvivenza e motilità, in linea con ruoli nel controllo, mediato dalla cromatina, di vie di segnalazione a valle. Un’espressione deregolata di ZNF322A è stata associata a fenotipi oncogeni in diversi contesti, inclusi programmi epiteliali alterati e firme legate all’invasione. In quanto proteina regolatoria nucleare, rappresenta un bersaglio utile per analizzare i circuiti trascrizionali, il controllo genico dipendente dalla cromatina e il ricollegamento delle vie di segnalazione in modelli rilevanti per la malattia.
ZNF322A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNF322 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNF322. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNF322. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNF322 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.