ZIP14 Plasmide Double Nickase (h): sc-411756-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZIP14 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZIP14 Double Nickase Plasmid (h) e il ZIP14 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC39A14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZIP14 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411756-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZIP14 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411756-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC39A14 codifica per il trasportatore di ioni metallici ZIP14, un membro della famiglia ZIP localizzato alla membrana plasmatica e negli endosomi, che media l’ingresso cellulare di cationi bivalenti, con un ruolo di primo piano nell’omeostasi di zinco e manganese. L’attività di ZIP14 influenza la funzione delle metalloproteine, le risposte allo stress ossidativo e la segnalazione metabolica, e interagisce con le vie infiammatorie negli epatociti e nelle cellule immunitarie, dove i segnali citochinici possono modulare l’espressione del trasportatore. Un’alterata gestione dei metalli dipendente da ZIP14 è stata associata a cambiamenti nella clearance sistemica del manganese e a fenotipi di neurotossicità, ed è stata studiata anche nel contesto del metabolismo epatico e dello stress infiammatorio. Di conseguenza, SLC39A14 viene spesso utilizzato per indagare la regolazione, dipendente dai metalli, dell’attività enzimatica, delle reti di trasportatori e dei programmi di adattamento allo stress in modelli cellulari umani.
ZIP14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC39A14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC39A14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC39A14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC39A14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.