ZDHHC5 Plasmide Double Nickase (h): sc-411833-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZDHHC5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZDHHC5 Double Nickase Plasmid (h) e il ZDHHC5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZDHHC5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZDHHC5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411833-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZDHHC5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411833-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZDHHC5 codifica una palmitoiltransferasi della famiglia DHHC che catalizza l’S-acilazione delle proteine substrato, regolando così l’associazione alla membrana, il traffico e la stabilità dei componenti della segnalazione. Attraverso cicli dinamici di palmitoilazione, ZDHHC5 influenza processi quali la localizzazione di recettori e canali ionici, il riciclo endocitico e l’organizzazione delle giunzioni cellula–cellula e delle membrane sinaptiche. Queste attività collegano ZDHHC5 a vie che governano il rimodellamento del citoscheletro e la trasduzione del segnale a livello della membrana plasmatica e dei compartimenti endosomiali. Una palmitoilazione proteica deregolata è stata associata alla segnalazione oncogenica, alla neurobiologia e a fenotipi infiammatori, rendendo ZDHHC5 un bersaglio rilevante per studiare come le modifiche lipidiche modulino l’omeostasi cellulare nelle cellule umane.
ZDHHC5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZDHHC5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZDHHC5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZDHHC5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZDHHC5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.