YTHDC2 Plasmide Double Nickase (h): sc-407254-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- YTHDC2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il YTHDC2 Double Nickase Plasmid (h) e il YTHDC2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira YTHDC2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
YTHDC2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407254-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
YTHDC2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407254-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YTHDC2 codifica un’elicasi dell’RNA contenente il dominio YTH che funge da lettore di m6A, accoppiando il riconoscimento di trascritti modificati con N6-metiladenosina al rimodellamento ATP-dipendente dei complessi ribonucleoproteici. Nelle cellule umane, YTHDC2 partecipa alla regolazione post-trascrizionale influenzando la stabilità dell’mRNA, l’efficienza di traduzione e le vie di sorveglianza dell’RNA, integrandosi con reti più ampie del metabolismo dell’RNA. È stato collegato al controllo di trascritti associati al ciclo cellulare e a programmi di espressione genica in risposta allo stress attraverso la gestione selettiva di RNA modificati. Un’espressione o un’attività deregolata di YTHDC2 è stata associata a firme di processamento dell’RNA alterate osservate in diversi contesti patologici, a sostegno del suo studio come nodo nella regolazione epitranscrittomica.
YTHDC2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus YTHDC2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di YTHDC2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di YTHDC2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con YTHDC2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.