VEZF1 Plasmide Double Nickase (m): sc-423670-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- VEZF1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il VEZF1 Double Nickase Plasmid (m) e il VEZF1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Vezf1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
VEZF1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VEZF1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Vezf1 codifica VEZF1, un fattore di trascrizione a dita di zinco che si lega al DNA, particolarmente espresso in contesti endoteliali ed ematopoietici, e che contribuisce a coordinare lo sviluppo vascolare e la definizione del pattern dei vasi sanguigni. VEZF1 regola programmi di espressione genica legati all’angiogenesi, alla differenziazione endoteliale e al controllo trascrizionale associato alla cromatina, interfacciandosi con vie di segnalazione che modellano l’integrità vascolare e la perfusione dei tessuti. Nei modelli murini, un’alterazione dell’attività di Vezf1 influisce sulla morfogenesi vascolare e sulla vitalità embrionale, rendendolo rilevante per lo studio dei meccanismi alla base dei difetti vascolari dello sviluppo e della disfunzione endoteliale. I suoi ruoli trascrizionali supportano inoltre l’indagine su come le reti regolatorie geniche vascolari contribuiscano alla neovascolarizzazione patologica e al rimodellamento vascolare associato all’infiammazione in contesti sperimentali di malattia.
VEZF1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Vezf1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Vezf1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Vezf1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Vezf1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.