Tescalcin Particelle di Attivazione Lentivirale (h): sc-408244-LAC

Il gene umano **TESC** codifica **tescalcin**, una piccola proteina legante Ca²⁺ con dominio **EF-hand**, arricchita in contesti ematopoietici e in cellule eccitabili, che agisce come regolatore calcio-dipendente della segnalazione e dei programmi di differenziamento cellulare. Tescalcin interagisce con partner selezionati per modulare l’equilibrio tra chinasi e fosfatasi e le vie collegate al Ca²⁺, influenzando processi quali proliferazione, impegno di linea e risposte trascrizionali a stimoli. Grazie alla sua sensibilità alle dinamiche del calcio intracellulare, tescalcin può incidere sulla segnalazione associata alle MAPK e su altre reti a valle che collegano i flussi di calcio a cambiamenti nell’espressione genica e nello stato cellulare. Un’espressione alterata di **TESC** è stata riportata in molteplici contesti rilevanti per la malattia, a supporto della sua utilità come nodo meccanicistico per lo studio di segnalazione deregolata, differenziamento e risposte cellulari allo stress.

Le particelle di attivazione lentivirale Tescalcin (h) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di TESC in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale Tescalcin (h) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione TESC, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di Tescalcin. L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo TESC e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.