syncytin Plasmide Double Nickase (h): sc-418235-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- syncytin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il syncytin Double Nickase Plasmid (h) e il syncytin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ERVW-1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
syncytin Plasmide Double Nickase (h) | sc-418235-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
syncytin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418235-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERVW-1 codifica la sincitina, una glicoproteina fusogena derivata da un envelope virale che promuove la fusione cellula‑cellula dei trofoblasti e contribuisce alla formazione e al mantenimento del sinciziotrofoblasto placentare. La fusione di membrana guidata dalla sincitina si integra con vie che regolano l’adesione cellulare, il rimodellamento del citoscheletro e la segnalazione mediata da recettori all’interfaccia materno‑fetale, plasmando la differenziazione e la funzione di barriera. Alterazioni dell’espressione di ERVW-1 o dell’attività della sincitina sono state associate a una placentazione disfunzionale e ad anomalie della biologia del trofoblasto, e sono state inoltre studiate in contesti in cui gli envelope retrovirali endogeni influenzano la modulazione immunitaria e le risposte allo stress cellulare. In quanto proteina di envelope специфica dell’uomo, la sincitina offre un modello per studiare come geni retrovirali cooptati incidano sui programmi di sviluppo e sull’omeostasi tissutale.
syncytin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ERVW-1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ERVW-1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ERVW-1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ERVW-1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.