SLC35C1 Plasmide Double Nickase (h): sc-410008-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35C1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35C1 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35C1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35C1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35C1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35C1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35C1 codifica il trasportatore di GDP‑L‑fucosio localizzato nel Golgi, che fornisce fucosio attivato alle glicosiltransferasi luminali, consentendo la fucosilazione “core” degli N‑glicani e la fucosilazione dei ligandi delle selectine. Regolando la capacità di fucosilazione cellulare, SLC35C1 influenza l’adesione e il traffico dei leucociti, il riconoscimento cellula‑cellula e, più in generale, la segnalazione dipendente dai glicani nelle vie secretorie ed endocitiche. Le varianti con perdita di funzione sono associate a disordini congeniti della glicosilazione caratterizzati da fucosilazione difettosa e disfunzione immunologica, rendendo SLC35C1 un nodo chiave per lo studio della regolazione del glicoma. La perturbazione di SLC35C1 è quindi ampiamente utilizzata per analizzare come il trasporto dei nucleotidi‑zucchero modelli l’adesione, la segnalazione legata all’infiammazione e la maturazione delle glicoproteine nelle cellule umane.
SLC35C1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35C1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35C1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35C1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35C1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.