Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RUNX3 Plasmide Double Nickase (m): sc-419487-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RUNX3 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RUNX3 Double Nickase Plasmid (m) e il RUNX3 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Runx3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RUNX3 Antibody (A-3): sc-376591
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RUNX3 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419487-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RUNX3 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419487-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Runx3 codifica il fattore di trascrizione RUNX3, una proteina legante il DNA con dominio Runt che interagisce con CBFβ per regolare l’impegno di linea, la differenziazione e l’omeostasi tissutale. Nelle cellule murine, RUNX3 integra segnali delle vie TGF-β/SMAD e Wnt/β-catenina per modulare programmi trascrizionali che controllano la progressione del ciclo cellulare, l’apoptosi e lo sviluppo delle cellule immunitarie. L’attività di Runx3 è particolarmente rilevante per la maturazione dei linfociti citotossici e la differenziazione epiteliale, ambiti in cui un’espressione o una funzione alterata è associata a proliferazione deregolata e a fenotipi infiammatori. Queste proprietà rendono Runx3 un nodo utile per analizzare i circuiti trascrizionali e il cross-talk tra vie di segnalazione in sistemi modello pertinenti per lo sviluppo e la malattia.
RUNX3 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Runx3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Runx3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Runx3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Runx3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.